豬瘟病毒疫苗株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

注意事項：產品僅用于科研1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱：豬瘟病毒疫苗株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 
規(guī)格： 50次
貨號：BK-P97058
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：
本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

特點優(yōu)勢：
   1.   特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
   2.   重現(xiàn)性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
   3.   靈敏性：該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
   4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
   6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
血紅素，高鐵血紅素；羥基血紅素  Hematin  分子式： C34H33FeN4O5     分子量：633.50

蕈青霉素;Paxilline  Paxilline*, from Penicillium paxilli  分子式：C27H33NO4  分子量：435.56

亞甲紫3RAX(>90%，BS)  Methylene violet 3RAX  分子式：C22H23ClN4      分子量：378.90

亞精胺0酸鹽  Spermidine phosphate salt hexahydrat
酵母浸粉；酵母粉  Yeast extract  物理性狀及指標：  色澤：……………………淺棕色

馬鈴薯葡萄糖水  Potato Dextrose Water  用法：稱取本品  26.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌 15分鐘,備用。  用途及描述：科研試劑，用于椰毒假單胞酵米面亞種和真菌的增菌培養(yǎng)。

麥芽浸膏  Malt Extract  用途及描述：科研試劑，微生物培養(yǎng)基  儲存條件：18~25°C，避光防潮密閉干燥。

明膠  Gelatin  分子式：    分子量：  物理性狀及指標：

腦心浸出液肉湯（BHI）顆粒  BHI Broth  產品介紹  用途:營養(yǎng)豐富,用于培養(yǎng)各種細菌。
脂酶，英文名或英文縮寫：Lipase(pocine pancreas)，級別：生物技術級，0.5u/mg，規(guī)格：5克  人胸苷酸合成酶(TS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

554-12-1metxyl propionate;  豬凝血因子Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒 Pig coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit

L-Lactide乳酸1克CP，70%  HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor,BAFF-RELISAKit 人B細胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

順二酰 3,6-Dixy7noxypyridczinq 13-33-1  Humanmelanocytestimulatinghormone,MSHELISA試劑盒人黑色素細胞刺激素(MSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L--GlucoseL-(-)-無水葡萄糖2×0.25毫升BR，95%  組織(NO)活性比色法定量檢測試劑盒50次
豬瘟病毒疫苗株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒一氧化硅shēng huà shì jì容量：25克  組織蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量檢測試劑盒20次

2687-91-4N-乙基-4-1完酮 (NEP)N-etxyl-2-pyrrolidone  HumanImmuneRNA,IrnaELISAKit人免疫核糖核酸(Irna)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

GOLD-N-GELRNADYE,200X12.5mlRT  人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

溴代三(二甲基基)...