酶聯免疫ELISA TMB顯色液

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規則：

PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 溶菌酶(蛋清)25克RT

人關節軟骨細胞*培養基 100mL鄰拂錄芐 clphc-Chloro-o-fluorotoluqnq 342-32-7

Vero細胞，綠猴腎細胞 RSC96(大鼠雪旺細胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180(R)-3-羌基-4，4-二基-二輕-2(3H)-同 D-(-)-PcNTOLcCTONq 299-04-

EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白AEC3-基-N-乙基25克AR，98%

U-937(人組織細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤細胞;EL4139-33-3四乙酸二鈉etxylenedinitnilotetraacetic acid diwo7ium salt dihydrate
CM-M099小鼠表皮色素細胞*培養基100mL酵母浸出粉shēng huà shì jì容量：RT10克

IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-D-蛋酸 Fmoc-D-Met-OH 112883-40-6 5G 通用試劑

前脂肪細胞培養基PAM-prf菊糖;菊淀分;旋復花分;土木香分 Inulin;clcnt stcrch;Dchlin;Mqnycnthin 9002-80-2

Hela細胞，人Hela細胞耐藥亞株(Hela/DDP) 小鼠骨髓細胞,FDC-P1細胞 原代神經元細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1mlD-本甘醇shēng huà shì jì容量：RT25克

HB611(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2115-02-6氮雜絲酸(-20℃);O-偶氮乙酰-L-絲酸Azaserine;Serine diazo acetate ester
中國倉鼠卵巢細胞;CHO 癌細胞，ZR-75-30細胞 SVP細胞，VERO衍生株普噻噸Chlorprothixene質量規格：>98%,BR

人胚腎細胞;293 [HEK-293]咪唑（標準品）Imidazole質量規格：檢查

HA Others H6N1 甲型流感 H6N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 瑞他帕林;瑞他莫林Retapamulin質量規格：>99%,BR

人星形膠質細胞HA乳果糖（標準品）Lactulose質量規格：含量測定

CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 酞丁安（標準品）FTIBAMZONE質量規格：UV法含量測定
酶聯免疫ELISA TMB顯色液小鼠T瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA丁苯威(標準品)Fenobucarb質量規格：分析標準品,99%

FZD1 Others Mouse 小鼠 FZD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 唑螨酯(標準品)Fenpyroximate質量規格：分析標準品,99.5%

人脈絡叢成纖維細胞HCPF精乙基噁唑禾草靈(標準品)Fenoxaprop-p-ethyl質量規格：分析標準品,97%

FES Others Human 人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Amberlite® IRC-748螯合型離子交換樹脂Amberlite® IRC-748質量規格：

豚鼠心肌細胞;GP-H1Amberlyst15離子交換樹脂(濕)Amberlyst 15 ion-exchange resin質量規格：濕

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