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    輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

    簡要描述:輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法輔酶Ⅱ系列公司正在出售的產品:NA平板(加青)(9cm) 英文名稱:Nutrient Agar 產品規格:10個/包 CIN-1瓊脂平板(9cm) 英文名稱:CIN-1 Agar 產品規格:10個/包 含青TSA培養基平板(7cm) 英文名稱:Tryptose Soya Agar 產品規格:10個/包 含青接觸皿培養基平板(5.5cm) 英文名稱:Con

    • 產品型號:
    • 廠商性質:經銷商
    • 更新時間:2023-12-29
    • 訪  問  量:549

    詳細介紹

    特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產品名稱:輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法

    產品規格:50管/24樣

    檢測方法:可見分光光度法

    產品貨號:BK-01S6350

    產品分類:輔酶Ⅱ系列
    商品介紹:

    測定意義:

    輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NADP+NADPH含量測定可以計算NADPNADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關。NADPH/NADP+比值不僅是細胞氧化還原態的主要標志之一,而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調控作用。

    測定原理

    分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+NADPHNADPH通過PMS的遞氫作用,使氧化型噻唑藍(MTT)還原為甲瓚,570nm下檢測吸光值,從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+NADPH,從而檢測NADP+含量。

    所需的儀器和用品

    可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

    樣本和試劑浪費!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

     

    細菌/細胞樣本:

    先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實驗方法學:

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點:

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    2 ug pCAMBIA2330 pCAMBIA2330 低溫運輸,-20℃保存

    纖維二糖-(CC)瓊脂 Cellobiose-polymyxin E Agar 250g

    10g  Indole  室溫保存

    50T 鏈球菌B族PCR檢測試劑盒   低溫運輸,-20℃保存

    5mL 黑色素細胞生長因子-不含TPA Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

    250mL Beta-ME-EDTA Solution(beta-EDTA溶液)  Beta-ME-EDTA Solution  常溫保存

    1.5mL miRNA尿素-PAGE上樣液,6× miRNAoN -20℃保存

    2 ug pGCsi/H1/Neo SHGFP pGCsi/H1/Neo SHGFP 低溫運輸,-20℃保存

    抗生素檢定培養基8號 Antibiotic Agar NO.8 250g

    1瓶 Cyc-Tag(S49)細胞株 Cyc-Tag(S49) 低溫運輸和保存

    CIN-1瓊脂平板(9cm) CIN-1 Agar 10個/包

    輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒可見分光光度法CDKL3/NKIAMRE  細胞周期蛋白依賴性激樣3抗體 規格: 0.2ml

    Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的驢抗豚鼠IgG 規格: 0.1ml

    Rabbit Anti-pig IgG  兔抗豬IgG 規格: 1mg

    Bestrophin 4  卵黃狀黃斑蛋白4抗體 規格: 0.2ml

    BRCC4/BRCC45  易基因復合蛋白4抗體 規格: 0.2ml

    Goat anti-Rabbit IgG whole serum  羊抗兔IgG抗清 規格: 1ml

    phospho-ITGB4(Tyr1494)  磷酸化整合素β4抗體 規格: 0.1ml

    LARG  Rho的核苷酸交換因子12抗體 規格: 0.2ml

    Rabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗羊IgG 規格: 0.1ml

    phospho-Tau protein(Ser214)  磷酸化微管相關蛋白抗體 規格: 0.1ml

    LDHC/Cancer,testis antigen 32  酸脫LDH-C(瘤/睪抗原32)抗體 規格: 0.1ml

    MAGEA11  黑色素瘤相關抗原11抗體 規格: 0.2ml 

    注意事項:

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

    若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

     


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