BL21DE3感受態細胞

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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠原成骨細胞)薯蕷皂甙質量規格：BR，含量≥95.0%Dioscin

CL-0288MA-891(小鼠癌高轉移細胞)5×106cells/瓶×2薯蕷皂素(標準品)質量規格：HPLC>98.0%,標準品Diosgenin

CLEC4F Others Rat 大鼠 CLEC4F / CLECSF13 人細胞裂解液 (陽性對照) 薯蕷皂素質量規格：>95%,BRDiosgenin

人前脂肪細胞-內臟cDNAHPA-v cDNAD-半胱氨酸鹽酸鹽一水質量規格：度大于98%,BR，一水物D-Cysteine  monohydrate

BCaP-37細胞，人癌細胞 猴腎細胞系,MA-104細胞 腸靜脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鈣蛋白酶抑制劑II(進口)質量規格：≥95%,美國進口Calpain Inhibitor II(ALLM)
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K14-戊氧基苯(>98.0%(GC))4-Amyloxybenzaldehyde質量規格：>98.0%(GC)

LDLR Others Mouse 小鼠 LDLR / LDL Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-丁氧基苯(>98.0%(GC))4-Butoxybenzaldehyde質量規格：>98.0%(GC)

猴源細胞4,4'-二羥基二苯(>98.0%(GC))4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether質量規格：>98.0%(GC)

CD58 Others Cynomolgus 食蟹猴 LFA-3 / CD58 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,2'-二羥基二苯(>98.0%(GC))2,2'-Dihydroxydiphenyl Ether質量規格：>98.0%(GC)

視網膜色素上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)4-苯甲酰-4'-二苯硫(>98.0%(GC))4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide質量規格：>98.0%(GC)
人微血管內皮細胞HMMEC1,10-雙[(4-乙氧羰基)苯氧基]癸烷質量規格：1,10-Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenoxy]decane

CD1D & B2M Others Human 人 CD1D & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4-苯二硫醇(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)1,4-Benzenedithiol

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS31,3-雙[2-(4-羥苯基)-2-丙基]苯(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)1,3-Bis[2-(4-hydroxyphenyl)-2-propyl]benzene

大鼠癌細胞;SHZ-88 肝癌細胞，BEL-7405細胞 MEF細胞，早代小鼠胚胎成纖維細胞雙(氨)降莰烷(含有)(>98.0%(T))質量規格：>98.0%(T)Bis(aminomethyl)norbornane (mixture of isomers)

MG-63, 人骨肉瘤細胞 Human1,4-雙(3-羥基苯氧基)苯(>96.0%(GC))質量規格：>96.0%(GC)1,4-Bis(3-hydroxyphenoxy)benzene
BL21DE3感受態細胞人APP-PS1雙基因轉染CHO細胞株;7WPS1全反式4-酮基視黃酸all-trans 4-Keto Retinoic Acid質量規格：美國進口

TFPI Others Human 人 TFPI 人細胞裂解液 (陽性對照) 5,8-環氧-13-順式視黃酸(非對映)5,8-Epoxy-13-cis Retinoic Acid(Mixture of Diastereomers)質量規格：美國進口

腎實質細胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)全反式5,8-環氧視黃酸 (非對映)all-trans 5,8-Epoxy Retinoic Acid (Mixture of Diastereomers)質量規格：美國進口

TPM4 Others Human 人 TPM4 / opomyosin 4 人細胞裂解液 (陽性對照) 去羥基比卡魯胺Deshydroxy Bicalutamide質量規格：美國進口

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1去氟比卡魯胺Desfluoro Bicalutamide質量規格：美國進口
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。