丙酮酸激酶（PK）測試盒紫外分光光度法

實驗方法學：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱：丙酮酸激酶（PK）測試盒紫外分光光度法

產品規格：50管/48樣

檢測方法：紫外分光光度法

產品貨號：BK-01S6604

產品分類：糖酵解系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

注意事項：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

100mL 加拿大樹膠 Canada Balsam 室溫避光保存

250mL Veronal Buffered Saline (VBS)  Veronal Buffered Saline (VBS)  常溫保存

5mL Tricine-SDS-PAGE上樣液 Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存

2 ug pUC 18 pUC 18 低溫運輸，-20℃保存

30次 柱式石蠟包埋組織DNAout  

2 ug pEGFP- C2 pEGFP- C2 低溫運輸，-20℃保存

K1 vitamin K1 1g

2 ug pET-22b(+)  pET-22b(+)  低溫運輸，-20℃保存

125mL Saponine Permeating Solution in PBS（皂素PBS滲透液）,5X  Saponine Permeating Solution in PBS,5X  常溫保存

1 管 Orgami B大腸桿菌 Origami B E.coli Strain -80℃保存

2 ug pROK2 pROK2 低溫運輸，-20℃保存

丙酮酸激酶（PK）測試盒紫外分光光度法phospho-Alpha synuclein (Tyr125)  磷酸化核突觸蛋白α抗體 規格: 0.1ml

RAC1+RAC2  GTP結合蛋白RAC1+RAC2抗體 規格: 0.2ml

TM4SF3  TM4SF3蛋白抗體 規格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM/RBITC  羅丹明標記的羊抗小鼠IgM 規格: 0.3mlRabbit Anti-Goat IgM/RBITC  羅丹明標記的兔抗羊IgM 規格: 0.3ml

PCDHA9  原鈣粘附蛋白α9抗體 規格: 0.2mlABHD4  α/β水解4抗體 規格: 0.2ml

DGCR2  DGCR2蛋白抗體 規格: 0.2mlRLBP1L1  結合蛋白1抗體 規格: 0.2ml

GPR49/LGR5  G蛋白偶聯受體49抗體 規格: 0.1mlCYP2R1  細胞色素P450 2R1抗體 規格: 0.2ml

ER-Alpha  雌激素受體α抗體（用于western blot） 規格: 0.1mlDonkey Anti-Guinea pig IgG/PE  PE標記的驢抗豚鼠IgG 規格: 0.1ml

CARD11  凋亡加強結構域蛋白11抗體 規格: 0.2mlSLC34A2  磷酸鈉協同轉運蛋白抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/AP  堿性磷酸（AP）標記的兔抗馬IgG 規格: 0.1mlRFESD  RFESD蛋白抗體 規格: 0.2ml

Hsp93  植物熱休克蛋白93抗體 規格: 1mlFAM166A  FAM166A蛋白抗體 規格: 0.2ml

B7-1/CD80  刺激分子B7-1蛋白抗體 規格: 0.1mlPSRC1  富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1抗體 規格: 0.2ml