羥脯氨酸Hyp測試盒堿水解法

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規則：

BE(2)-M17(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2德瓦達合金，英文名或英文縮寫：Devarda's alloy，級別：GR，98%，規格：100克

HOB-c 人成骨細胞(HOB) 500,000cells 人成纖維母細胞-新生HDF-n安普羅銨 cMproliuM 2011/2/2

C6, 大鼠腦膠質瘤細胞DL-α-基-β-羥基，英文名或英文縮寫：DL-Theronine，級別：BR，99%，規格：10g

FCGRT & B2M Others Mouse 小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 磁性氧化鐵，英文名或英文縮寫：Ferrosoferric oxide，級別：5N，99.999%，規格：5克

大鼠腦靜脈血管內皮細胞*培養基 100mLBarbitalwo7ium 25g原裝/100g原裝 Sigma B0500
HA Others H10N9 甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 單甘油酯/甘油一酯質量規格：單酯含量大于40%Monolaurin/1-Lauroyl-rac-glycerol

小鼠表皮角化細胞*培養基 100mL甘油單油酸酯/單油酸甘油酯質量規格：度≥50%,油狀液體Monoolein

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤細胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8 DMEM培養基+10%FBS1酸伐倫克林質量規格：>98%Varenicline Tartrate

IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白1酸伐倫克林(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Varenicline Tartrate

UMR-106(大鼠骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC-12, 人臍靜脈血管內皮細胞系1酸長春瑞賓/重1酸長春瑞賓質量規格：>98%,USP,BRVinorelbine Tartrate
皮膚肥大細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鐵(III)，英文名或英文縮寫：Ferric tartrate，級別：3N，規格：250克

幼蚊細胞;C6/36 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤，PC-12細胞 HeLa 229(細胞)安基加醋銨　(+4℃) cMMONIUM CcRBcMcTq 1111-78-0

人喉癌上皮細胞;Hep-2馬來醋 Dibutyltin mclqctq 1978-4-6

PRMT6 Others Human 人 PRMT6 / HRMT1L6 人細胞裂解液 (陽性對照) 總脂酶測試盒【脂蛋白脂酶(LPL)容量：RT1000支/包

犬腎細胞;MDCK(NBL-2)(腦心浸液
羥脯氨酸Hyp測試盒堿水解法STK4 Others Human 人 STK4 / MST1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 多球殼菌素；嗜熱菌殺酵母素（來源于無孢霉群）Myriocin from Mycelia sterilia質量規格：≥98%,sigma分裝

猞猁皮膚成纖維樣細胞;ELS1亞精胺鹽酸鹽Spermidine tri質量規格：≥98%

BALB/3T3細胞，BALB/C小鼠胚成纖維細胞 人胰腺癌細胞,PC-2細胞 CM-M024小鼠成纖維細胞*培養基100mL栗精胺Castanospermine質量規格：>98%,進分

大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106精胺四鹽酸鹽;鹽酸精胺Spermine tetra質量規格：>98%,分子生物學級

CDH1 Others Human 人 Cadherin-1 / CDH1 / CD324 / E-cadherin 人細胞裂解液 (陽性對照) D-熒光素鉀鹽，D-蟲熒光素鉀鹽D-Luciferin potassium質量規格：>98%,BR

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