肉桂醇脫氫酶（CAD)測試盒紫外分光光度法

特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱：肉桂醇脫氫酶（CAD)測試盒紫外分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣

檢測方法：紫外分光光度法

產(chǎn)品貨號：BK-01S6926

產(chǎn)品分類：其它系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

實驗方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

100mL Tris飽和 Tris-Saturated Phenol 常溫避光保存

2 ug pCMV-Tet 3G pCMV-Tet 3G 低溫運輸，-20℃保存

葡萄糖酪胨瓊脂 Dextrose Casein-peptone Agar 250g

25g L-  L-Proline 室溫避光保存

明膠生化管  20支/盒

2 g NAC（抗氧化劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

10mL Ethidium Bromide Solution,10mg/mL  Ethidium Bromide Solution,10mg/mL  常溫保存

50g 脫脂奶粉（雜交專用） Nonfat Milk Powder 室溫

2 ug pIRES-neo pIRES-neo 低溫運輸，-20℃保存

STAA添加劑  1ml*5支

1瓶 LLC細胞株 LLC 低溫運輸和保存

肉桂醇脫氫酶（CAD)測試盒紫外分光光度法UBE2J2  泛素蛋白連接J2抗體 規(guī)格: 0.2ml

c-fos  c-fos抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-human IgG/Cy3  Cy3標記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

Mouse anti-Bovine IgG ascites  小鼠抗牛IgG腹水 規(guī)格: 1ml

MDMX  MDM2樣P53蛋白結(jié)合抗體 規(guī)格: 0.2ml

CPEB1  細胞質(zhì)多聚苷酸結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CGB  嗜鉻粒素B抗體 規(guī)格: 0.1ml

NF-H/Neurofilament H/Neurofilament 200  高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

COMMD8  銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

MAGEB4  黑色素瘤相關(guān)抗原B4抗體 規(guī)格: 0.2ml

C18orf1  18號染色體開放閱讀框1抗體 規(guī)格: 0.2ml

TERT  端粒逆轉(zhuǎn)錄抗體 規(guī)格: 0.1ml

注意事項：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數(shù)值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時間不夠，可以延長反應(yīng)時間（反應(yīng)時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。