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    UDPG焦磷酸化酶(UPG)測試盒微量法

    簡要描述:UDPG焦磷酸化酶(UPG)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:快速硫化氫試驗瓊脂進(jìn)口、國產(chǎn)H2S Test Medium250克彎曲桿菌的硫化氫試驗脫氧核糖核酸甲基綠瓊脂基礎(chǔ)進(jìn)口、國產(chǎn)Dnase Agar Base With Methyl Green100克用于細(xì)菌的DNA水解試驗波爾頓肉湯進(jìn)口、國產(chǎn)Bolton Selective Enrichment Broth250克彎曲桿菌的選擇性增菌培養(yǎng)彎

    • 產(chǎn)品型號:
    • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
    • 更新時間:2023-12-24
    • 訪  問  量:1065

    詳細(xì)介紹

    特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

    產(chǎn)品名稱:UDPG焦磷酸化酶(UPG)測試盒微量法

    產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

    檢測方法:微量法

    產(chǎn)品貨號:BK-01S6986

    產(chǎn)品分類:糖原系列
    商品介紹:

    測定意義:

    UDPG焦磷酸化酶是生物體糖原合成過程中的關(guān)鍵酶。在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化,將1-磷酸葡萄糖與UTP分子合成為UDP-葡萄糖(UDPG)。

    測定原理

    UGP可逆催化反應(yīng)生成1磷酸葡萄糖,在磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下將NADP轉(zhuǎn)化為NADPH340nm的吸光值增加速率反映了UGP活性。

    自備實(shí)驗用品及儀器

    天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。

    所需的儀器和用品:

    可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

    四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

    建議正式實(shí)驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗流程,避免實(shí)驗

    樣本和試劑浪費(fèi)!

    1、樣本制備

    組織樣本:

    取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

    勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

    【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

     

    細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

    先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

    提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

    12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

    4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

    QQ截圖20220307153537.png 

    實(shí)驗方法學(xué):

    一、肝素的配制:

    市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

    肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

    二、血液樣本的收集:

    全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

    1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

    2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

    選擇抗凝的注意點(diǎn):

    ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

    ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

    ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

    ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

    用于測定。

    250U Tth DNA聚合 Tth DNA Polymerase -20℃保存

    250mL PBlec Washing Solution in PBS,pH7.0,2X   PBlec Washing Solution in PBS,pH7.0,2X   常溫保存

    20次 裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞制備試劑盒(含高效轉(zhuǎn)化液) S. pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit 常溫

    50T 水貂腸炎病毒PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    RNS  250g

    1瓶 Tca-8113細(xì)胞株 Tca-8113 低溫運(yùn)輸和保存

    煌綠瓊脂 Brilliant Green Agar 250g

    1mL 纖連蛋白 ( 人血 ) Fibronectin(FN) From Human Plasma     -20℃保存

    50T 副流感病毒Ⅰ型PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    300µL 兔抗雞IgY,辣根過氧化物標(biāo)記 Rabbit Anti-Chicken IgY,HRP Conjugate -20℃保存

    2 ug Super PiggyBac Transposase Super PiggyBac Transposase 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

    UDPG焦磷酸化酶(UPG)測試盒微量法DSCC1  DSCC1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009)  磷酸化小板源性生因子受體-B抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Phospho-HER2 (Tyr686)  磷酸化HER2受體抗體 規(guī)格: 0.1mlInhibin beta A/Activin A  抑制素βA抗體 Inhibin βA 規(guī)格: 0.2ml

    Mouse Anti-Guinea pig IgG  小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格: 1mgRabbit Anti-Biotin/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1ml

    BFSP2/Phakinin  晶狀體蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-c-Raf(Ser296)  磷酸化原基因c-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Goat Anti-Mouse IgG/FITC  FITC標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.3mlHPV16-E6  人類狀瘤毒16抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)  磷酸化叉蛋白家族抗體 規(guī)格: 0.1mlH9N1 Neuraminidase  A型毒H9N1神經(jīng)型抗體 規(guī)格: 0.2ml

    ATRN  吸引素抗體 規(guī)格: 0.2mlMATH1  腸道分化干細(xì)胞MATH-1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

    Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939)  磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格: 0.1mlEukaryotic aspartyl protease  天冬蛋白家族蛋白抗體 規(guī)格: 1ml

    Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118)  磷酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格: 0.1mlACE1/CD143  管緊張素轉(zhuǎn)換ACE1抗體 0.1ml

    ZNF379/ZDHHC9  鋅指蛋白379抗體 規(guī)格: 0.2mlCRISP3  富含半胱分泌蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

    Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1ml

    SLC44A1/CD92  溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族44成員1抗體 規(guī)格: 0.2ml 

    注意事項:

    1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

    2、對照管只需要做一管。

    3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

    4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

    對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

    若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

     


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